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salutemed.it Forum Index » » CFS Stanchezza cronica » » RNAP (RNase L Test in PBMC's) x corrispondenza postale
Autore RNAP (RNase L Test in PBMC's) x corrispondenza postale
KIO


Registrato: Oct 29, 2003
Messaggi: 1275
Località: Lugano
Inviato: 2004-01-28 14:02   
LABORATORIO in BELGIO che FA IL TEST RNase L Protéine
e altri laboratori nel mondo.

http://www.redlabs.be/fr/index.html
(pagina disponibile anche in inglese e olandese)

per i link della pagina vi rimando alla pag originale,
tranne che x uno che ho riportato sotto.

Questions posées fréquemment par les patient(e)s .

Comment interpréter le dosage RNAP (RNase L Protéine?
Que signifie 37kDa LMW-Protein?
Quand le résultat de l'Analyse de la RNase L est négatif, cela signifie-t-il que je ne souffre pas du SFC?
Est-ce que l'I.N.A.M.I. prévoit un remboursement?
Quand le résultat est "Négatif", est-il possible qu'une pension d'invalidité me soit refusée?
Quelle est la signification d'un test "Positif"?
Quand le résultat est "Positif", est-ce que mes enfants doivent être testés?
Comment puis-je introduire une demande pour le test RNAP?
L'Analyse des Protéines RNase présente-t-elle un risque?



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Comment interpréter le dosage RNAP (RNase L Protéine)?


La valeur indiquée dans la colonne de normalité ou anormalité du formulaire de résultat correspond au rapport entre les quantités relatives de deux formes de la RNase L (Ribonucléase L, une protéine présente dans une population de globules blancs qui aide notre corps à se défendre contre les virus). Ce rapport est calculé comme la quantité de la forme anormale de bas poids moléculaire (LMW), divisé par la quantité de la forme normale de haut poids moléculaire (HMW), multiplié par dix ({LMW/HMW}x10).

Plus la forme anormale est présente (et donc moins l'est la forme normale), plus cette valeur augmente. Des quantités élevées de la forme LMW (Low Molecular Weight = Bas Poids Moléculaire) de la RNase L ont été remarquées dans un groupe de patients souffrant du Syndrome de Fatigue Chronique (publié par le Prof. Suhadolnik, de la Temple University à Philadelphie dans le 'Journal of Interferon & Cytokine Research', vol. 17, 1997).

Nous considérons une valeur inférieure à 2 comme étant dans les limites normales. Des valeurs supérieures à 2 sont compatibles avec un diagnostic clinique de Syndrome de Fatigue Chronique. Attention: le résultat du test RNAP ne peut pas être considéré séparément de l'état clinique du patient. Le diagnostic de 'Syndrome de Fatigue Chronique' ne peut être établi que quand on répond à une série d'autres critères cliniques .



Que signifie 37kDa LMW-Protein?


La forme anormale de bas poids moléculaire, a un poids de 37 kilo Dalton (37 kDa). C'est la forme LMW (Low Molecular Weight = Bas Poids Moléculaire) de la RNase L qui a été identifiée.




Quand le résultat de l'Analyse de la RNase L est négatif, cela signifie-t-il que je ne souffre pas du SFC?


Nos résultats indiquent que 94,7 % des patients qui remplissent les derniers critères du CDC sont porteurs du marqueur. Des études sont en cours de faon à déterminer la cause de l'absence du marqueur dans les 5% restants.




Est-ce que l'I.N.A.M.I. prévoit un remboursement?


Jusqu'à présent le test n'est pas reconnu par l' I.N.A.M.I. et n'est donc pas remboursé. Le test RNAP est un test à but de recherche. R.E.D. Laboratories s'est fixé comme objectif d'élaborer et de mettre sur le marché un 'test-kit' RNAP pour que le dosage puisse également être effectué dans des laboratoires de routine clinique. Dès que ce kit sera sur le marché, il sera possible d'en demander la reconnaissance et le remboursement par l' I.N.A.M.I. .
Certaines sociétés d'assurances privées prévoient un remboursement (partiel). Il incombe aux patients de s'en informer .




Quand le résultat est "Négatif", est-il possible qu'une pension d'invalidité me soit refusée?


Un résultat "Positif" peut aider à obtenir une pension d'invalidité. Cependant l'Administration de la Sécurité Sociale et la plupart des caisses d'assurances privées ne reconnaissent aucun test de laboratoire comme preuve de diagnostic du SFC.




Quand le résultat est "Positif", est-ce que mes enfants doivent être testés?


Il n'y a pas d'évidence convaincante que le SFC soit une maladie transmissible ou d'origine génétique. Cette question doit être discutée avec votre médecin.




Quelle est la signification d'un test "Positif"?


Un résultat "Positif" de l'analyse RNase L indique une teneur anormalement élevée de la RNase L de Bas Poids Moléculaire dans les cellules mononucléaires. Des données publiées récemment indiquent que la présence de ce marqueur, associée à la présence des symptômes caractéristiques, est en forte corrélation avec un diagnostic définitif de SFC.




Comment puis-je introduire une demande pour le test RNAP?


N'importe qui peut nous demander d'exécuter ce test. Certaines conditions et précautions spécifiques doivent cependant être respectées pour que le test soit effectué de manière optimale. Le prélèvement sanguin doit être effectué dans des tubes adéquats contenant l'anticoagulant correct et nous parvenir dans les quatre heures après prélèvement.

En Belgique, vous pouvez demander à votre médecin de prendre contact avec nous.

Ailleurs, nous vous conseillons de prendre contact avec un laboratoire à même d'isoler des cellules mononucléaires de sang périphérique qui se chargera de nous envoyer l'échantillon sur carboglace. Une liste de laboratoires peut être obtenue dans ce site Laboratory Testing Services ( http://www.redlabs.be/fr/index.html ) = (VEDI SOTTO).




L'Analyse des Protéines RNase présente-t-elle un risque?

Le test requiert un échantillon sanguin prélevé par un médecin ou toute autre personne autorisée à effectuer un prélèvement. Le risque n'est pas plus important que pour n'importe quelle analyse sanguine.


last updated: 16/01/01
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Laboratory Testing Services
( http://www.redlabs.be/fr/index.html ).

Routine test | Confirmation test | PCR-based assays


RNAP (RNase L Test in PBMC's)

Evaluation Quantitative de la RNase L: Analyse Aidant au Diagnostic du Syndrome de Fatigue Chronique

Le Syndrome de Fatigue Chronique (SFC) est reconnu comme l'une des maladies chroniques les plus courantes dans le monde. C'est un syndrome complexe ayant une étiologie inconnue, qui affecte des personnes de tous âges. Actuellement le SFC est défini par ses symptômes(1), le plus important étant une fatigue chronique, épuisante, qui persiste six mois ou plus. Les patients souffrent en outre de nombreux autres problèmes physiques comme la myalgie, l'arthralgie, ainsi que de problèmes cognitifs et de troubles du sommeil.

Découverte d'un Marqueur pour le SFC

En 1995, le Dr Suhadolnik et ses collaborateurs à l'Université de Temple (Philadelphia, PA) ont découvert une nouvelle protéine intracellulaire ayant des propriétés biochimiques comparables à la RNase L, l'une des enzymes induites par l'interféron. Ces enzymes, qui incluent également la 2'-5' Oligoadenylate Synthetase et la Protéine Kinase RNA-dépendente (PKR) jouent un rôle important dans la protection des cellules contre les infections virales.(2,3) Le poids moléculaire de cette nouvelle protéine est environ la moitié de celui de la RNase L native. On y fait référence comme la protéine de faible poids moléculaire ('Low Molecular Weight', LMW) ; par analogie, la RNase L native est décrite comme l'espèce de poids moléculaire élevé ('High Molecular Weight', HMW) .

En collaboration avec les médecins Daniel Peterson et Paul Cheney, le Dr Suhadolnik a pu démontrer que cette protéine LMW se retrouvait à un niveau anormal dans un sous-groupe de patients souffrant du SFC.(4,5) Ces constatations ont été confirmées de manière indépendante par le Dr Bernard Lebleu de l'Institut de Génétique Moléculaire de l'Université de Montpellier en France, en collaboration avec le Dr Kenny De Meirleir de l'Université Libre de Bruxelles en Belgique.(6)

Développement d'une Analyse Clinique

En 1998, R.E.D. Laboratories a commencé à offrir un test permettant de déterminer le niveau de protéines RNase L LMW dans les cellules sanguines isolées des patients. L'analyse est réalisée par 1) préparation d'un extrait cytoplasmique de cellules mononucléaires périphériques du patient, 2) combinaison de cet extrait avec une sonde marquée qui se lie spécifiquement avec des protéines liant les 2'-5'A comme la RNase L native et les espèces LMW, 3) électrophorèse en gel de SDS-polyacrylamide, et 4) densitométrie de manière à déterminer les quantités relatives des protéines LMW et HMW (voir Figure 1).


Interprétation des Résultats

Les résultats sont quantitatifs et des valeurs de référence sont fournies. Par analyse densitométrique, on peut déterminer une valeur numérique (rapport) correspondant au ratio "quantité de Protéine LMW présente divisée par la quantité de RNase L native (HMW) présente" multiplié par un facteur 10 (ou (LMW/HMW) x 10.

Les données préliminaires indiquent:

Negatif: Rapport <0.1 - 1.9 XXXXX Positif: Rapport = 2.0 ou plus

(Attention: Les résultats de ce test doivent être utilisés en complément de toute autre donnée clinique pertinente avant d'établir un diagnostic et/ou de donner une recommandation pour un traitement. Les valeurs normales actuelles sont préliminaires et pourront être modifiées en fonction d'études cliniques complémentaires.)
Ce test a été développé par RED Laboratories. Ses caractéristiques d'utilisation ont été déterminées par RED Laboratories. Ce test n'est pas approuvé ni autorisé par le U.S Food and Drug Administration. Le FDA a estimé que l'obtention d'une approbation ou d'une autorisation n'était pas nécessaire. Ce test est utilisé à des fins d'analyse médicale. Il ne doit pas être considéré dans un but de recherche.

Commander un Test

Vous avez besoin d'Acrobat Reader pour ouvrir les fichiers téléchargés. Cliquez ici pour télécharger le plug-in.



Pour commander le test, vous pouvez utiliser le formulaire de demande. Afin de choisir le bon formulaire de demande, sélectionnez une des options suivantes, en fonction de votre résidence :

USA (zipped)
USA (pdf)


AUTRES PAYS (zipped)
AUTRES PAYS (pdf)
En fonction de votre pays, choisissez une des options suivantes pour un contact:

USA
AUTRE PAYS

Préparer les Echantillons

L'Analyse des Protéines RNase L (RNAP) requiert un culot de cellules mononucléaires de sang périphérique (PBMC) préparé à partir de 30 ml de sang total minimum, anticoagulé sur sodium-héparine. Le sang total doit être stocké à température ambiante avant préparation, et le culot doit être préparé au maximum quatre heures après le prélèvement. La préparation des PBMCs est complexe et nécessite du matériel et des équipements spécialisés. Pour préparer le culot, un Manuel d'Instruction (zipped) (pdf) est disponible pour les laboratoires et peut être téléchargé en cliquant sur le hyperlink. (Si nécessaire, vous pouvez également télécharger Acrobat Reader)

Stockage, Expédition des Culots & Résultats

Les culots de PBMCs doivent être stockés à -70°C et expédiés sur carboglace. Afin d'expédier les échantillons, nous recommandons les contacts et les courriers suivants, qui ont l'expérience du transport de PBMC sur carboglace :

http://www.dhl.com/
http://www.fedex.com/
http://www.worldcourier.com/
(Un 'pro forma invoice' est disponible pour ces courriers.)

Les résultats de l'analyse seront disponibles dans les cinq jours ouvrables après réception des échantillons par notre laboratoire. R.E.D. Laboratories peut faxer les résultats si désiré. Les résultats sont confidentiels .

Références

Holmes, G., et al., "Chronic Fatigue Syndrome: A Working Case Definition," Annals of Internal Medicine 108:387-389 (1988).
Suhadolnik, R., et al., "Changes in the 2-5A Synthetase/RNase L Antiviral Pathway in a Controlled Clinical Trial with Poly(I)-Poly(C12U) in Chronic Fatigue Syndrome," In Vivo 8:599-604 (1994).
Suhadolnik, R., et al., "Upregulation of the 2'-5'A Synthetase/RNase L Antiviral Pathway Associated With Chronic Fatigue Syndrome," Clinical Infectious Disease 18:S96-S104 (1994).
Suhadolnik, R., et al., "Biochemical Evidence for a Novel Low Molecular Weight 2'-5'A-Dependent RNase L in Chronic Fatigue Syndrome," Journal of Interferon & Cytokine Research 17:377-385 (1997).
Suhadolnik, R., et al., "Biochemical Dysregulation of the 2'5A Synthetase/RNase L Antiviral Defense Pathway in Chronic Fatigue Syndrome," Journal of Chronic Fatigue Syndrome 5:223-242 (1999).
De Meirleir, K., et al., "A Novel 2'-5'A Binding 37 kDa RNase L as a Biochemical Marker for Chronic Fatigue Syndrome," American Journal of Medicine 108: 99-105 (2000).


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